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湖南师范大学硕士研究生入学考试自命题科目考试大纲
考试科目代码：复试科目 考试科目名称： 基因工程
一、考试内容及要点
基因工程概述
基因工程的基本概念，基因工程的基本流程，基因工程诞生的标志，基因工程有哪些主要应用？
基因工程的工具酶
基因工程的工具酶有哪些？限制性内切核酸酶的特点，同尾酶与同位酶的概念，DNA聚合酶和Klenow大片段的作用，反转录酶和Taq酶的作用方式及缺点，DNA连接酶的作用， 碱性磷酸酶的作用及用途，末端脱氧核苷酸转移酶的作用,Golden Gate一步克隆法和克隆快线一步克隆法的原理和应用等。
第三章 基因工程的载体
基因工程载体的概念及必须满足的基本条件，质粒载体的主要特征与基本结构识别，λ噬菌体载体的携带能力，COS位点的作用，克隆载体的概念，人工微小染色体的概念，质粒载体的标记基因的种类。α互补筛选的原理，表达载体的概念与基本结构，T7启动子系统的组成与优势、融合蛋白表达系统的载体结构与优缺点，真核表达载体的结构特点等。
第四章 目的基因的获取与制备
基因组文库的概念，基因组文库的构建方法， cDNA文库的概念和构建流程，构建cDNA文库需要用到哪些工具酶，合成cDNA第二条链有哪些方法，基因文库的载体类型等。常规PCR技术的基本原理与引物设计要点，PCR反应体系的主要成分，PCR反应主要程序。逆转录PCR、反向PCR、多重PCR及荧光定量PCR的概念与原理以及应用，Ct值的概念。蛋白质工程的概念，PCR介导定点突变的原理，DpnI介导定点突变的原理与优点。
第五章 目的基因转入受体细胞的方法
目的基因转入大肠杆菌细胞的方法，感受态细胞的概念。目的基因转入植物细胞的方法，花粉管诱导法的概念，基因枪法的概念，Ti质粒的结构，T-DNA的作用，双元载体的组成，Ti质粒介导外源基因导入植物细胞的机制。显微注射法、逆转录病毒介导法、精子载体法，体细胞克隆法等的概念与各自的优缺点。转基因斑马鱼载体的结构特点等。
第六章 目的基因重组子的鉴定
核酸分子杂交的概念，探针的类型与标记方法。Southern杂交、Northern杂交、Western杂交及菌落（嗜菌斑）原位杂交的基本原理以及三者之间的比较。末端终止法DNA测序的基本原理， DNA自动测序的基本原理,二代DNA测序的类型，焦磷酸测序的原理与优点，Solexa测序的原理与优点，三代测序的种类与优势，单细胞测序的原理及应用。
第七章 基因工程在基因功能研究中的应用
胚胎原位杂交的概念，基因芯片的概念与类型，基因芯片的流程与应用。
转座子诱变的原理与优点，基因敲除的概念与流程，条件基因敲除的原理与优点，打靶载体的构建策略，Cre- LoxP系统及FLP-FRT系统的作用原理与应用，RNA干扰的概念与分子机制，RNA干扰的优点与应用。TALEN打靶技术的原理和优点，DNA断裂修复的类型，CRISPR的概念，CRISPR基因编辑的原理与优缺点，CRISPR基因编辑的应用。
凝胶迁移阻滞实验的原理与应用，染色质免疫沉淀的原理与应用，酵母双杂交系统的原理与应用，免疫共沉淀的原理与应用等。
如何研究基因在心脏发育和心血管疾病中的功能？
第八章 转基因植物
外源基因导入植物的方法， Ti质粒的结构特点， Ti质粒介导植物基因转移的过程。抗虫转基因植物的概念，抗除草剂转基因作物的概念。植物生物反应器的概念。转基因生物的安全性和主要影响因素等。
第九章 转基因动物
转基因动物的概念，显微注射法制备转基因动物的主要过程。逆转录病毒法制备转基因动物的主要过程。胚胎干细胞的概念。胚胎干细胞制备转基因动物的流程。体细胞核移植法及其制备转基因动物的主要流程。动物器官生物反应器的概念。转基因小鼠的鉴定方法。
第十章 基因治疗
基因治疗的概念，基因治疗的基本策略，基因治疗的载体类型。单基因遗传病的基因治疗策略，肿瘤基因治疗的策略，耐药基因治疗的概念，自杀基因治疗的概念等。CAR-T的概念与优点，一代二代三代CAR-T的发展现状等。艾滋病基因治疗的策略等。
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